PCR elemzés: mi ez? Hogyan kell szedni a PCR-analízis

Ez nem is olyan régen kifejlesztett egy megbízható, rendkívül érzékeny és gyors módszer a diagnózis a különböző fertőző betegségek emberben. Egy ilyen módszer az úgynevezett „PCR-analízis”. Mi ez, mi a lényeg, hogy mit tud azonosítani mikroorganizmusok és hogyan vegye, le fogjuk írni ezt a cikket.

A felfedezések története

Fantázia a polimeráz-láncreakció (PCR) egy amerikai tudós Keri Myullis 1983-ban Kezdetben a szabadalmaztatott diagnosztikai eljárás által „Cetus Corporation,” amelyben dolgozott és az alkotója. 1992-ben azonban minden jog és a szabadalmak eladták a cég „Hoffman-La Roche”. Ezt követően kiderült, hogy hasonló vizsgálatokat végeztünk párhuzamosan, számoltak be más amerikai biológusok, így Elis Chen, David Edgar, John rre. 1980-ban részt ebben a kérdésben, és a szovjet tudósok A. Slyusarenko A. Kaledin és S. Gorodetsky. Ezért, hogy meghatározza a kizárólagos szerzői jog tulajdonosának nem volt lehetséges. Sok kiemelkedő biokémikusok hozzájárultak a fejlesztési módszerek a polimeráz reakció és a CERN szabadalmaztatták újítások. Ezen a ponton elemzését PCR végezzük az egész különlegesen felszerelt laboratóriumokban.

Összefoglaló PCR diagnosztikai

PCR elemzés: mi ez, és hogyan működik? A módszer lényege abban a tényben rejlik, hogy segítségével egy speciális DNS-polimeráz enzim in vitro, hogy a mennyiségi növekedés specifikus mikróbás környezetben. Ehhez ismételten többszörösen álló DNS-anyag. Így a kórokozó jelenlétét egy mintában az összeg növekedni fog rovására biokémiai laboratóriumi manipuláció, és a baktériumok nem lesz nehéz felismerni a mikroszkóp.

Hogy a tanulmány az anyag?

Ahhoz, hogy az elemzés elvégzéséhez szükséges:

• A DNS-templát;
• primereket anyagot összekötő végük a fragmens;
• termostabil DNS polimeráz enzimet;
• vegyszerek, megfelelő működésének biztosítása érdekében az enzimek;
• puffer-oldat szükséges megfelelő feltételek megteremtése a növekedés és fejlődés a DNS-anyag.

Elvégzéséhez PCR működtetni 25-30 ismétlődéseit, amely három lépésből áll: denaturálás, összehibridizálás és lánchosszabbítás.

Ahhoz, hogy elemezni polimezarnoy láncreakció segítségével egy speciális eszköz - cycler. Modern berendezés lehetővé teszi, hogy telepítse a szükséges fűtési és hűtési csövek programot, hogy megszüntesse a hibákat a diagnózist.

Hova kell a diagnózist?

Polimezarnoy láncreakció módszerrel használják különböző területeken az orvostudomány:

• Törvényszéki használni, hogy azonosítsa a genetikai anyagot, például haj, nyál vagy vér;
• PCR-analízis a vér segít genotipizáló, például kimutatására az egyes genetikai ültetett válasz egy specifikus gyógyszer;
• módszerrel meghatározott családi kötelékek az emberek között;
• legkeresettebb-PCR módszer vált az orvosi diagnózis meghatározására különböző fertőző betegségek.

Mi fertőzések kiderül PCR?

Így, az orvostudomány már régóta sikeresen alkalmazzák PCR-analízis. Mi az, amit már megtanult. És néhány kórokozó mutatható vele? PCR diagnosztizált következő fertőzések :

• hepatitis A, B, C;
• ureaplasmosis;
• candidiasis;
• chlamydia;
• mycoplasmosis;
• bakteriális hüvelygyulladás;
• mononucleosis infectiosa;
• trichomoniasis;
• HPV-fertőzés;
• tuberkulózis;
• herpesz fertőzés az 1. és a 2. típusú,
• Helicobacter pylori fertőzés;
• citomegalovírus;
• diftéria;
• szalmonellózistól
• HIV-fertőzést.

Továbbá, PCR-módszereket használnak a rák diagnosztizálásában.

módszer előnyeit

Diagnosztikai PCR számos előnye van:

1. Nagy érzékenységű. Még csak néhány DNS-molekulák mikroorganizmus PCR analízis segítségével határozzuk meg jelenlétét a fertőzés. Segít Eljárás krónikus és látens előforduló betegségek. Gyakran az ilyen esetekben, hogy a mikroorganizmus nem művelt más módon.
2. Annak érdekében, hogy megvizsgáljuk bármilyen megfelelő anyagból, mint például a nyál, vér, szexuális szelekció, szőr, epithelsejtek. A leggyakoribb a vérvizsgálat és az urogenitális tampont PCR.

3. Nem igényel kiterjesztett növekvő tenyészetekben. Az automatizált folyamat diagnosztika előállítását teszi lehetővé tanulmány eredményei után 4-5 óra.
4. A módszer szinte teljesen hiteles. Felvett csak izolált esetekben a tévesen negatív eredményt.
5. Képes azonosítani többféle kórokozók egy minta anyag. Ez nem csak felgyorsítja a folyamatot a diagnózis a betegség, hanem jelentősen csökkenti az anyagköltséget. Gyakran előfordul, hogy az orvos által előírt átfogó elemzését a PCR. Ár felmérés, amely meghatározó a hat kórokozók, mintegy 1500 rubel.

Ajánlások az analízis előkészítéséhez

Az eredmények érvényes legyen, a PCR vizsgálatokat kell vizsgálni, ajánlásait követve az előzetes felkészülés a diagnózis:

1. A kiszállítás előtt a nyál tartózkodnia kell a táplálkozás és a gyógyszer előtt 4 órával a mintavétel az anyagot. Közvetlenül a beavatkozás előtt, öblítse ki a száját forralt vízzel.
2. A fenti szabályok mentén kell, és ha a mintavételt a belsejében az arcát. Öblítés után ajánlatos elvégezni egy könnyű masszázs a bőr, hogy kiadja prosztata váladék.
3. A vizelet általában gyűjtik otthon. Ehhez meg kell, hogy végezzen alapos WC a nemi szervek. Egy steril műanyag tartályba kell gyűjteni 50-60 ml vizelet. Ez ajánlott a nők, hogy helyezze a tampont a hüvelybe, és a férfiak, amennyire csak lehetséges, hogy húzza a bőrt szeres tisztaságának biztosítása az anyag. Nem viheti az anyag a menstruáció.
4. A szállítás a sperma, hogy tartózkodjanak a szexuális érintkezés során a 3 nappal az anyaggyűjtés. Továbbá, az orvosok azt tanácsolják, hogy hagyjon fel a használata a szauna és a forró fürdőt, az alkohol és a fűszeres ételeket. 3 órán át analízis előtt szükséges, hogy tartózkodjanak a vizelés.
5. Hogy telik az urogenitális kenet, például, ha az elemzés egy chlamydia PCR, mind a nők és a férfiak ajánlott, hogy a szexuális többi 3 napig. 2 héttel az elemzés nem az antibiotikumokat. Egy hétig meg kell, hogy hagyja abba az intim gélek, kenőcsök, vaginális kúpok, douching. 3 órával a vizsgálat tartózkodniuk kell a vizelés. Menstruáció alatt kerítés anyagot nem végzik el, mindössze 3 nappal megszűnése után pecsételő vehet urogenitális kenetet.

PCR terhesség alatt

A várakozási idő a baba, sok fertőző betegség, szexuális úton terjedő betegségek, rendkívül veszélyes a normális magzati fejlődés. STD kiválthatja méhen belüli fejlődés, a vetélés vagy koraszülés, veleszületett fejlődési rendellenességek, a gyermek. Ezért fontos, hogy a terhesség korai szakaszában szűrés PCR. Pass elemzés szükséges a regisztráció során - legfeljebb 12 hétig.

Kerítés anyag származik a méhnyakon egy speciális kefével. Az eljárás fájdalommentes, és nem jelent veszélyt a baba. Normális esetben a terhesség alatt analizáljuk Chlamydia PCR-módszerrel, valamint a ureaplasmosis, mikoplazmózis, citomegalovírus, herpesz, papillomavírus. Az ilyen vizsgálat komplex úgynevezett PCR 6.

PCR diagnosztizálására HIV

Tekintettel arra, hogy az eljárás a polimeráz láncreakció nagyon érzékeny a test és a feltételeket a diagnózis, számos tényező befolyásolhatja az eredményt. Ezért PCR analízist a HIV-fertőzést nem megbízható módszer hatékonysága - 96-98%. A fennmaradó 2-4% a vizsgálat ad hamis pozitív eredményt.

De bizonyos esetekben anélkül PCR diagnózis a HIV nem tud. Általában ez a sor, hogy az emberek a hamis negatív ELISA. Ezek a számok azt mutatják, hogy az adott személy még nem alakult ki a vírus elleni antitestek, és nem lehet kimutatni nélkül számának növelésével több. Hogy ez lehet elérni végző vérvizsgálattal PCR módszerrel.

Szintén szükség van a diagnózis gyermek életének első évében született HIV-pozitív anyák. A módszer az egyetlen módja annak, hogy megbízhatóan meghatározni a helyzetét a gyermek.

PCR diagnosztizálására hepatitis

Polimeráz láncreakció eljárás lehetővé teszi DNS kimutatására a vírus a hepatitis A, B, C, illetve előtt antitestek képződését a fertőzés vagy tünetek kezdete. Különösen hatékony a PCR-analízis a hepatitis C, mivel 85% az ilyen betegség tünetmentes, és anélkül, hogy kellő időben történő kezelés krónikussá válik.

Időbeni felismerése a kórokozó segít komplikációk elkerülése és a hosszú távú kezelés.

Integrált PCR szűrővizsgálattal

Átfogó PCR elemzés: mi ez? Ez a felmérés módszere polimezarnoy láncreakció, amely magában foglalja a meghatározása többféle fertőzések: Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, Trichomonas, citomegalovírus, ureaplasmas urealitikum, herpesz 1. és 2. típusú, gonorrhoea, humán papillomavírus. Az ár a diagnózis tól 2000 3500 rubel. függően a klinikán, anyagok és berendezések, valamint a fajta elemzést: kvalitatív vagy kvantitatív. Mi szükséges az Ön esetében - az orvos dönt. Bizonyos esetekben, ha csak egyszerűen jelenlétének kimutatására a kórokozó más, például a HIV, a fontos szerepet, amelyet mennyiségi meghatározásához. a továbbiakban: „PCR-elemzése 12” a diagnózis minden a fenti kórokozók vizsgálata.

Megfejtése az elemzés eredményeit

Transzkripciós PCR elemzés egyszerű. Már csak 2 index skála - a „pozitív” és „negatív”. Miután érzékelte a kórokozó orvosok 99% -os megbízhatósági -ik megerősíti a betegség jelenlétét, és elkezdeni a kezelést a beteg. A mennyiségi meghatározásának módszere fertőzés megfelelő oszlop index száma észlelt baktériumok kerül meghatározásra. Csak az orvos meg tudja határozni, milyen mértékben a betegség, és előírják a szükséges kezelést.

Bizonyos esetekben, például a HIV-fertőzés meghatározására PCR-rel, a negatív eredmény, szükség van további felmérések megerősítik ezeket a számokat.

Hol kell a vizsgálatot elvégezni?

Amennyiben pass-PCR analízis az állami klinikán vagy privát laboratórium? Sajnos, az önkormányzati egészségügyi intézmények berendezések és módszerek gyakran elavult. Ezért jobb, hogy részesítsék előnyben a magánlaboratóriumok modern berendezések és magasan képzett személyzet. Ezen túlmenően, egy magánklinikán kap az eredmények sokkal gyorsabb.

Moszkvában, sok magánlaboratóriumok hez PCR analízis különböző fertőzések. Például az ilyen klinikák a "Vita", "Integrált Clinic", "Happy Family", "Uro-Pro" végzett PCR-ben. Survey ár 200 rubel. meghatározására kórokozó.

Ebből arra lehet következtetni, hogy a diagnózis a fertőző betegségek PCR a legtöbb esetben egy gyors és megbízható módon kimutatni a kórokozó a szervezetben a fertőzés korai szakaszában. Mégis, bizonyos esetekben, hogy válasszon más diagnosztikai módszerek is. Határozza meg, hogy szükség van egy ilyen vizsgálat csak a szakember. PCR analízis dekódolás is megköveteli a szakmai megközelítés. Kövesse az orvos tanácsát, és nem ad saját vizsgálatokat, amelyekre nincs szükség.